陈超然、陈昌福：用二氧化氯防治鱼类水霉病的实验研究 |
| 出处：科学养鱼 作者：陈超然 陈昌福 水产养殖网 2018-11-09 17:15:00 |
二氧化氯(ClO2)是对病毒、细菌、真菌等各种微生物具有极强杀灭能力的卤素类制剂。与其他卤素类制剂相比，ClO2不仅对各种微生物的杀灭力更强，而且通过氧化分解完成其杀灭微生物过程后的生成物是水、氯化钠、微量CO2和有机物，无有害残留物和致癌物质。所以，自从ClO2问世以来，已经被广泛地用于医疗卫生防疫、食品加工业、油井解堵和畜禽活动场所等的消毒。
鱼类的水霉病是由多种水生真菌引起的一种常见继发性疾病。过去有用孔雀石绿和甲醛等防治该病，然而已经有研究结果表明，孔雀石绿和甲醛对动物的细胞均具有致畸变作用。因此，寻求既安全又能有效地防治水产动物水霉病的药物，是一个具有现实意义的课题。卢次勇等(2000)的实验结果表明，ClO2对须发癣菌和红色毛癣菌等皮肤真菌有很好的杀灭效果。为了证实ClO2是否对由水生真菌引起的鱼类真菌病具有防治效果，特进行本实验。
一、材料与方法
1.药物及原液的配制
用于本实验的商品二氧化氯(生产批号为001208)，含量为6.6%。临用前打开包装袋并准确称取10克二氧化氯溶解于100毫升蒸馏水中，摇匀，即为二氧化氯的实验原液。
2.实验鱼及处理
本实验用鱼为取自华中农业大学水产站饲养池的鲫鱼种和泥鳅，在每个86厘米×53厘米×50厘米的塑料水族箱中盛装30升经充分曝气去氯后的自来水，于每个水族箱内放养10尾鲫或20尾泥鳅。驯养7天后，逐尾检查实验鱼，淘汰活动异常和有外伤的鱼体，将活动正常而无外伤鲫的尾柄两侧用解剖刀刮去部分鳞片和用纱布擦拭泥鳅尾部数次，即人为制造创伤后，放回水族箱中充气饲养。实验期间不投喂饵料，控制水温在(20±1)℃。
3.水霉菌来源及人工感染的方式
从华中农业大学水产站饲养池中收集10尾寄生有大量多子水霉的鲢，置于盛有20升养殖池水的塑料水族箱中，待其死亡后继续放置2天，以使水霉菌进一步生长。用解剖刀刮下体表的外菌丝并切下水霉菌寄生处的部分肌肉，磨碎后连同刮下的水霉菌丝一起倒回盛有养殖池水的水族箱中，作为人工感染用的水霉菌液。向上述每个饲养有实验鱼的水族箱中加入4升水霉菌液，对实验鱼进行水霉病的人工感染。
4.用药量及用药程序
对不同的水族箱，分别加入水霉菌液后的0、24小时、48小时，定量加入二氧化氯原液，使饲养水中二氧化氯的终浓度分别达到20毫克/升、30毫克/升、40毫克/升和50毫克/升。搅动水体，使药液均匀地分布在水中。另外设置不添加药液的水族箱作对照组。
5.防治效果的判定
在人工感染水霉菌结束后14天内，每天观察记录水族箱中鱼体的活动和创伤部位的水霉菌的着生状况。根据实验鱼体上水霉菌丝的寄生状况，并结合实验鱼的死亡数量，判断二氧化氯防治鱼类水霉病的效果。
二、结果
1.对鲫人工感染水霉菌后二氧化氯的防治效果
以不同的用药量和用药程序施用二氧化氯，在14天的实验观察期内，观察实验组和对照组鲫体表水霉菌的着生状况和死鱼数量。
实验鲫体表水霉菌的着生状况和死鱼数量如表1所示。
由表1可以看出，在实验鱼接触水霉菌之前就用药的实验组感染率和死亡率均比较低，而当鱼体接触水霉菌24小时和48小时后再用药时，其感染率和死亡率均有明显上升。
2.对泥鳅人工感染水霉菌后二氧化氯的防治效果
以泥鳅作实验鱼的实验结果如表2所示。
由表2可以看出，以不同的用药量和用药程序施用二氧化氯时，在14天的实验观察期内，实验和对照组实验泥鳅的感染率和死亡率趋势与用鲫进行的实验结果基本相同。即实验鱼未接触水霉菌之前的用药组，二氧化氯对鱼类水霉病的防治效果最好。随着感染时间的延长，防治效果虽然有下降的趋势，但与对照组相比仍然显示出了明显的防治效果。
三、讨论
1.二氧化氯对鱼类水霉病的预防效果
向水族箱中加入水霉菌液后，立即添加二氧化氯药液的实验组（即0小时实验组），由于水霉菌的孢子尚未萌发菌丝而寄生在实验鱼体上，因此，可视为二氧化氯对水霉病的预防效果。根据本实验结果，表明二氧化氯对水霉菌的孢子有较好的杀灭作用，将其用于养殖水体消毒，可以有效地降低受伤鱼体感染水霉菌的比例和减少因水霉菌的寄生而引起的死亡数量。但是，本实验结果也同时表明了在实验鲫和泥鳅中，还是有一部分鱼体感染了水霉甚至出现了死亡，这是否因为处于不同萌发阶段的水霉菌孢子对二氧化氯存在不同的感受性或者是本实验中使用的药物浓度偏低的缘故，尚有待进一步研究。
2.二氧化氯对鱼类水霉病的治疗效果
使实验鱼与水霉菌液接触48小时和96小时，再添加二氧化氯药液的实验组(即48小时和96小时实验组)，因为在用药前水霉菌孢子有可能已经寄生到鱼体受伤部位，因此，可视为二氧化氯对水霉病的治疗效果。根据本实验结果，初步证明了二氧化氯对鱼类的水霉病有一定的治疗作用。对感染水霉菌24小时后用药的治疗效果优于48小时后用药的实验组，这一实验结果表明采用二氧化氯治疗鱼类早期的水霉病是可行的。
本实验已经证明了二氧化氯对水体中和寄生在鱼体上的水霉菌孢子和菌丝有杀灭作用，而关于最佳用药浓度与程序以及二氧化氯杀灭水霉菌的机理等，则需要深入研究。
华中农业大学，教育部农业微生物重点开放实验室
陈超然 陈昌福
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